你可以去Nalgene买一种冷冻盒子(商品名 NALGENE Cryo 1度C Freezing Container) 此盒子分两层 外层要加isopropyl alcohol(异丙醇) 冷冻小管放入此盒子内层再将此盒子放入-80度C 的冷冻柜至少四小时 再将冷冻小管放入液态氮中 我的论文就是做冷冻新鲜分离的细胞的最佳条件 冷冻小管绝不能用无血清 血清可用50%或 70%(其实70%最好) 重点是解冻的程序很重要 关系存活率　其重要性不亚於冷冻的medium的比例 我的解冻程序是 Avarbock et al. 1996(Nature Medicine 2,pp 693-696,1996) 冷冻小管自液态氮中取出 放入38度C(因我的是鸡的primary culture)解冻　约2分钟内解冻完全 移入15 ml离心管中 一滴一滴(dropwise)将含10%血清之培养基(不同人用的medium培养基皆不同)加入 边加边摇动离心管　加入约三倍冷冻液量的体积(记得要加一滴就摇几下) 即假如你的冷冻液是1CC 你就加3CC缓冲　但不能一下子加入3ｃｃ 要 加一滴就摇动离心管　慢慢加完 800g离心5min 倒掉上清液 以2CC含10%血清的培养基再次清洗细胞 800g离心5min 以trypan blue exclusion计算存活 将细胞养入flask > ==> [email protected] (somewhere i want to...) 的文章中提到: > 请问冻primary cell > 到底要用全血清还是无血清阿 和DMSO比例又是多少????? > 可不可以大家给我ㄧ个建议...谢谢各位 -- * Origin: 中山大学-美丽之岛BBS * From: 220.142.91.175