作者satantaco (TACO)
看板Biology
標題Re: 問個pcr的小問題
時間Fri Feb 24 13:47:01 2006
※ 引述《meiosisLin (吽爸)》之銘言：
: ※ 引述《[email protected] (我也很盡心)》之銘言：
: : 不是耶，我做的就是一般的PCR ^^"
: : 那根RT也一樣嗎？
: : 但是在做出來的片斷上應該有的是poly-A耶，
: : 因為學長有建議我把接出來的片段放到TA-II vector裡面，
: : 這個vector中不就是有poly-t的序列嗎？
: : 那這樣在pcr的過程中，poly-A到底是怎麼產生的呢？ @@~
: 妳作的應該是要把PCR的產物
: 放入TA clone 的plasmid吧？
: 一般來說PCR產物本來就會在兩端有多一個A和T
: 所以不需要而外的工作
: PCR完成之後馬上可以作TAclone
: and越新鮮越好.....TA的成功率會越高
完全是你使用的Taq酵素本身的特性
可以去看manu
有的會在尾端+A
所以TA clone利用這種特性來達成
那有的Taq是不會+A的
尤其是一些有校對能力的Pol.
那這樣合成出的pcr產物就無法進行TA clone
詳情可以去看一些有賣taq廠商的manu
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