作者satantaco (TACO)
看板Biology
标题Re: 问个pcr的小问题
时间Fri Feb 24 13:47:01 2006
※ 引述《meiosisLin (吽爸)》之铭言：
: ※ 引述《[email protected] (我也很尽心)》之铭言：
: : 不是耶，我做的就是一般的PCR ^^"
: : 那根RT也一样吗？
: : 但是在做出来的片断上应该有的是poly-A耶，
: : 因为学长有建议我把接出来的片段放到TA-II vector里面，
: : 这个vector中不就是有poly-t的序列吗？
: : 那这样在pcr的过程中，poly-A到底是怎麽产生的呢？ @@~
: 你作的应该是要把PCR的产物
: 放入TA clone 的plasmid吧？
: 一般来说PCR产物本来就会在两端有多一个A和T
: 所以不需要而外的工作
: PCR完成之後马上可以作TAclone
: and越新鲜越好.....TA的成功率会越高
完全是你使用的Taq酵素本身的特性
可以去看manu
有的会在尾端+A
所以TA clone利用这种特性来达成
那有的Taq是不会+A的
尤其是一些有校对能力的Pol.
那这样合成出的pcr产物就无法进行TA clone
详情可以去看一些有卖taq厂商的manu
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