看板Biology
標 題為什麼用PCR產物當作template的效果反而會比holo genome的差呢？
發信站清華資訊(楓橋驛站) (Sun Jan 22 15:34:33 2006)
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從BAC(~200KB)要p出1000bp的產物，有些困難，
有時BAC斷裂，會得到較短的產物
在四次實驗裡，有兩次會p不出東西來，
所以我想，用已得到的產物當作template再p，應該會比較容易吧！
可是，我把PCR產物經過電泳回收純化過後，也跑膠確定只有一條band，
拿來當作template，結果卻得到很少量的產物，而且，膠上也呈見smeal的狀況，
為什麼會這樣呢？
是PCR本身限制，還是電泳回收純化的方法不夠純呢？
事實上，每次我用小片斷的DNA當作template，作pcr，效果都不是很好。
我用的polymerase是生工代理的Pfu.
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1F：推 midmoom:最好不要用PCR產物再進行擴增，如果不得已，請用nest PCR 01/24 03:49