看板Biology
标 题为什麽用PCR产物当作template的效果反而会比holo genome的差呢？
发信站清华资讯(枫桥驿站) (Sun Jan 22 15:34:33 2006)
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从BAC(~200KB)要p出1000bp的产物，有些困难，
有时BAC断裂，会得到较短的产物
在四次实验里，有两次会p不出东西来，
所以我想，用已得到的产物当作template再p，应该会比较容易吧！
可是，我把PCR产物经过电泳回收纯化过後，也跑胶确定只有一条band，
拿来当作template，结果却得到很少量的产物，而且，胶上也呈见smeal的状况，
为什麽会这样呢？
是PCR本身限制，还是电泳回收纯化的方法不够纯呢？
事实上，每次我用小片断的DNA当作template，作pcr，效果都不是很好。
我用的polymerase是生工代理的Pfu.
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1F：推 midmoom:最好不要用PCR产物再进行扩增，如果不得已，请用nest PCR 01/24 03:49