※ 引述《[email protected] (攻堅強者莫之能勝)》之銘言： : ※ 引述《[email protected] (anticitrinin)》之銘言： : : 要看你抗體的用途而定 : : 外面做的通常只幫你測到 ELISA : : 要是你是要做 immunofluorescence 用的 : : 包你做到博士畢業都還不知道 poly 的能不能 work : : 建議你找一家至少幫你測到 WB 的 : 這個自己測就好啦 一天就搞定 : 為什麼要等到博士畢業？ : 不好意思 不是吐槽 只是對於這句話有點不懂 一般抗體公司只用 ELISA 作出【相對堪用】的效價株，然後拿培養液給你測試 OK 假設他是用 peptide conjugate KLH 好了，一般會選兩端一起打 那你的工作有 1.construct recombinant protein N-terminal and C-terminal (E. coli express) 2.Transfect to eukaryotic cell 3.prepare target cell lysate (for exemple : the protein specific to spermatogonia) for endogenous protein screen 4.Immunofluorescence 5.For IP 6.Microinjection block (maybe) 然後如果其中一項不對，他們會告訴你再 boost 再測 結果他們下一次拿給你的仍然是只用 ELISA 測好的 如果 ELISA = recombinant protein (WB) = eukaryotic cell express protein (WB) = native protein = the epitope of the protein complex 那我想 proteome 就不會太難了 或是你覺得只要其中幾項符合即可，不符合的地方你也不會想去了解，只要論文趕的出來 那也沒什麼討論的必要了 : : 衷心給你一個建議 : : 抗體還是自己作的好 : : 你沒看各家牌子的 catalog 上標明 "for IP" "for WB" 等等不一而足 : : 這代表什麼? : : 這表示只有作的人自己知道這株抗體的狀況 : : 既然抗體對你的研究這麼重要，自己動手做應是責無旁貸 --

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