作者citrinin (anticitrinin)
看板Biology
标题Re: 请问作antibody的公司....?
时间Fri Jan 2 23:51:43 2004
※ 引述《[email protected] (攻坚强者莫之能胜)》之铭言:
: ※ 引述《[email protected] (anticitrinin)》之铭言:
: : 要看你抗体的用途而定
: : 外面做的通常只帮你测到 ELISA
: : 要是你是要做 immunofluorescence 用的
: : 包你做到博士毕业都还不知道 poly 的能不能 work
: : 建议你找一家至少帮你测到 WB 的
: 这个自己测就好啦 一天就搞定
: 为什麽要等到博士毕业?
: 不好意思 不是吐槽 只是对於这句话有点不懂
一般抗体公司只用 ELISA 作出【相对堪用】的效价株,然後拿培养液给你测试
OK 假设他是用 peptide conjugate KLH 好了,一般会选两端一起打
那你的工作有
1.construct recombinant protein N-terminal and C-terminal (E. coli express)
2.Transfect to eukaryotic cell
3.prepare target cell lysate (for exemple : the protein specific to
spermatogonia) for endogenous protein screen
4.Immunofluorescence
5.For IP
6.Microinjection block (maybe)
然後如果其中一项不对,他们会告诉你再 boost 再测
结果他们下一次拿给你的仍然是只用 ELISA 测好的
如果 ELISA = recombinant protein (WB) = eukaryotic cell express protein (WB) =
native protein = the epitope of the protein complex
那我想 proteome 就不会太难了
或是你觉得只要其中几项符合即可,不符合的地方你也不会想去了解,只要论文赶的出来
那也没什麽讨论的必要了
: : 衷心给你一个建议
: : 抗体还是自己作的好
: : 你没看各家牌子的 catalog 上标明 "for IP" "for WB" 等等不一而足
: : 这代表什麽?
: : 这表示只有作的人自己知道这株抗体的状况
: : 既然抗体对你的研究这麽重要,自己动手做应是责无旁贷
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