作者baden (-_-)
看板BioChem_92
標題Re: [討論] 第四題的問題
時間Wed Sep 3 23:53:22 2003
嗯...
因為LB是黃色的才測OD600丫
因為600NM是不吸黃光的
當cell 沒有長OD=0ꄊcell>1 長太多
會有apoptosis
這樣就算你送入competent cell 他的活性也比較低吧
MY 意見
-_-
뀠引述《scorpio995 (Bryan)》之銘言：
: 這一題我找了許久
: 我只確定說測OD 590的值是要看細胞的生長情況
: 其實不一定要測590，很多protool是測600
: 但還沒找到為何要OD值達到某一範圍
: 我看到的protocol有說要0.4, 0.5等
: OD值愈高是代表細菌含量愈高
: 我自己的看法是細菌的含量必須夠多，一來是這樣transformation成功
: 的細胞數目也會愈高，另外我覺得跟生長環境的壓力有關
: 這是我查到有關的一些資料：
: 質體DNA需藉由轉形作用（Transformation）的技術，將之引介入勝任細胞
: （competent cell）及大腸桿菌體中，藉由寄主細菌的系統來達成複製DNA的目的。
: 進行細菌轉形作用最常用的一種方法是加入大量的氯化鈣（Calcium chloride），
: 導致大腸桿菌的細胞壁發生結構上的變化，變成勝任細胞，而有利於質體DNA進入細菌
: 細胞內。
: 大部分大腸桿菌品系的轉形效率在10*5~10*8之間，即每mg質體DNA中成功的
: 轉形細胞數目，影響此效率之因子與勝任細胞狀況或吸收DNA之能力有關。而這2項因子
: 又受是否用對數生長期之細菌，處理時是否將細胞保持在4 °C以下，
: 以及氯化鈣處理細胞的時間所影響。勝任細胞製備完成後，利用熱休克處理，使
: 細胞外鞘的油脂變性而刺激轉形作用，爾後給予一段時間恢復後，可用對抗生素之
: 抗性標記，進行篩選工作。
: 以上僅供參考啦，大家看看有沒有更好的答案
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2F：→ Lambdoidal:是長太滿營養不良還是太老? 推 210.85.22.222 09/04
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