作者baden (-_-)
看板BioChem_92
标题Re: [讨论] 第四题的问题
时间Wed Sep 3 23:53:22 2003
嗯...
因为LB是黄色的才测OD600丫
因为600NM是不吸黄光的
当cell 没有长OD=0ꄊcell>1 长太多
会有apoptosis
这样就算你送入competent cell 他的活性也比较低吧
MY 意见
-_-
뀠引述《scorpio995 (Bryan)》之铭言：
: 这一题我找了许久
: 我只确定说测OD 590的值是要看细胞的生长情况
: 其实不一定要测590，很多protool是测600
: 但还没找到为何要OD值达到某一范围
: 我看到的protocol有说要0.4, 0.5等
: OD值愈高是代表细菌含量愈高
: 我自己的看法是细菌的含量必须够多，一来是这样transformation成功
: 的细胞数目也会愈高，另外我觉得跟生长环境的压力有关
: 这是我查到有关的一些资料：
: 质体DNA需藉由转形作用（Transformation）的技术，将之引介入胜任细胞
: （competent cell）及大肠杆菌体中，藉由寄主细菌的系统来达成复制DNA的目的。
: 进行细菌转形作用最常用的一种方法是加入大量的氯化钙（Calcium chloride），
: 导致大肠杆菌的细胞壁发生结构上的变化，变成胜任细胞，而有利於质体DNA进入细菌
: 细胞内。
: 大部分大肠杆菌品系的转形效率在10*5~10*8之间，即每mg质体DNA中成功的
: 转形细胞数目，影响此效率之因子与胜任细胞状况或吸收DNA之能力有关。而这2项因子
: 又受是否用对数生长期之细菌，处理时是否将细胞保持在4 °C以下，
: 以及氯化钙处理细胞的时间所影响。胜任细胞制备完成後，利用热休克处理，使
: 细胞外鞘的油脂变性而刺激转形作用，尔後给予一段时间恢复後，可用对抗生素之
: 抗性标记，进行筛选工作。
: 以上仅供参考啦，大家看看有没有更好的答案
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◆ From: 61.228.174.150
1F：→ stemcell:细菌长太满而死亡 用apotosis称呼怪怪的 推 210.85.36.109 09/03
2F：→ Lambdoidal:是长太满营养不良还是太老? 推 210.85.22.222 09/04
3F：→ stemcell:产生的废物太多产生毒性 推 210.85.36.109 09/04