※ 引述《rich34877 (richard)》之铭言： : 因为目前没做过电生理实验，所以看到paper有电生理的DATA : 有点吃力 (以往只念过初阶的生理学) : 源由:主要是探讨发炎激素於神经系统的影响，所以接触到神经生理 : 但实验室没人做过，找google神大却几乎是简体，有查到许多 : 研究生的论文PDF档，但还是似懂非懂，所以想爬文请教各位。 虽然这和认知神经科学使用的电生理方法不一样,但这是我们实验室在做的东西 我试着给你一些解释 : 想问: : 1.什麽是细胞外电生理活性纪录? : 是利用NaCL刺激细胞兴奋?产生去极化而测EPSP?那为什麽测细胞外? : 而只能测EPSP吗? 神经细胞藉由电(例如, 动作电位)和化学讯号(神经传导物质, glutamate, GABA等)传递 讯息. 当突触後神经细胞的树突接收到兴奋性神经传导物质,细胞内depolarized, 细胞外相对hyperpolarized,理论上可以在细胞外(树突所在位置)放置纪录电极获得讯号 但是,单一细胞讯号过小,通常只有在细胞同向排列一致下(例如在海马回或皮质),才能 测量到较大的讯号(即field EPSP,fEPSP). 要刺激突触前细胞有很多方式,电刺激其细胞轴突,或是加入KCl(bath or local)等等. NaCl是细胞外液的主要成份,所以一般会加在刺激电极的溶液中. 细胞外测量是因为实验比较容易完成,且能反映一群细胞的变化,但是也因此解析度有限. 如果实验中没有在bath加入任何blocker,那测量的讯号仅能解释为fPSP,若有加入 GABA receptor blocker,测得讯号应为fEPSP;而加入glutamate receptor blocker,讯号 应为fIPSP. 可参考Chiang, et al. 2012 J Neurosci http://ppt.cc/xUCY : 2.什麽是细胞内电生理活性纪录? : 是利用醋酸钾使细胞怎了?为什麽测IPSP? : 3.什麽又是全细胞电生理? 相对於细胞外纪录,你可以将电极"插入"细胞内测量细胞内外电流或电位变化,但是因为 电极的电阻过大,或是细胞因此破洞导致讯号测量不准.Neher和Sakmann在1970年代发明 Patch Clamp的技术,大幅提升讯号测量精准度,全细胞纪录(whole-cell recording)就是 其中一种测量方法,可以将细胞控制在特定电位(Voltage-clamp)测量电流变化(EPSC or IPSC),或是注入电流(Current-clamp)观察电位变化(EPSP or IPSP). : 4.sIPSC 的data是看频率还是振幅?频率低表示什麽?振幅低又表示什麽? : mIPSC 什麽是微抑制性突触後电流 : sEPSC 是什麽? : mEPSC 是什麽? s: spontaneous,自发性的讯号,包含了动作电位产生的传导物质释放,以及无关动作电位 的传导物质释放. 端看实验设计所加入的blocker,推论测量讯号是兴奋或抑制性 m: miniature,自发性的微小讯号,当动作电位无法产生时(加入TTX, Na channel blocker) 仍然可以观察到的vesicle release. 这两个实验通常会分析frequency和amplitude. 在sIPSC中,lower fre可能反映了抑制性神 经元变得较不兴奋(lower excitability, lower mini release probability, fewer number of functional synapses); lower amp则可能是lower release probability, fewer number of postsynaptic receptors, 等等. 不过以上实验通常需要其他实验来支持其某种可能推论. : 我的信箱:[email protected] 因为问题很多所以拜托各位了 感恩 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 120.126.39.210