作者steve42125 (Shiburin)
看板Biotech
标题[求救] H1299 细胞型态异常
时间Sat Apr 1 16:10:22 2023
各位好，
用H1299细胞进行实验到现在已经约3年还是第一次遇到这个无解的问题，
最近细胞养到後面会有明显异常的型态变化，但迟迟找不到可能的原因，
希望对细胞培养有经验的前辈能分享一些看法。
https://imgur.com/2lQiF4i
https://imgur.com/6AqjJoR
上图为该细胞从液态氮解冻48小时後的型态，
看起来排列规则整齐，培养基背景乾净，一切正常。
https://imgur.com/IfryXQA
https://imgur.com/afmPpic
上图为最近细胞培养大概6-7代之後开始细胞会有很明显异常的型态变化
看起来会有点皱缩和烂烂的样子，且背景的细胞碎屑明显增多，
有确认过非细菌和霉浆菌污染，
培养箱最近也有校正跟灭菌过，
实验室另外一个养该细胞的同学也没有遇到这种情况，
我自己也是第一次遇到，有把medium跟FBS全部换新但还是发生一样的情况，
已经被这问题困扰3个多月没办法进行实验。
不知道有没有人有遇过类似的问题，或着能分享可能可以修改的地方？
若有需要我提供更详细的资讯也请告诉我，谢谢！
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1F：→ Bows: 你细胞是不是有点太满了，你上面第一张图也有这种transform 04/01 23:24
2F：→ Bows: ation，有时候密度也会影响，我1299是没有遇到这种状况，但 04/01 23:24
3F：→ Bows: 有其他株是密度太高就会变形 04/01 23:24
4F：推 jamesonly: 同楼上觉得有点满 04/04 09:42
5F：→ steve42125: 谢谢楼上两位提供的看法，其实最近再更细节观察发现还 04/06 01:05
6F：→ steve42125: 会伴随trypsinzation没办法完全detach细胞的状况，我 04/06 01:05
7F：→ steve42125: 会尝试看看再较低的confluence进行继代，先谢谢两位了 04/06 01:05