作者MLSHBen (酷喔)
看板Biotech
标题Re: [求救] 点突变primer insert
时间Thu Apr 1 20:31:12 2021
想回的有点多乾脆直接回文
之前跟您一样用KOD (PLUS)
当时同时做10个point mutation clone 结果只有2个clone有正常点突变
其他的clone都是跟您一样的问题
询问比较熟的同仁 说可能跟primer有关 (poly A之类的导致primer dimer之类的我忘了)
说也有可能跟cycle数有关 可能cycle数太高导致错误 (当初调到30)
後来先尝试改用别的polymerase (PrimeSTAR GXL) 同时降低cycle数 (降到16) 但primer一样
就没再发生这问题了
给您做参考
之前在这个板上受到一些帮助
希望我微薄的经验也能或多或少帮到您
祝实验顺利~
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