作者janewu945 (I am who I am)
看板Biotech
标题[讨论] Protein 在MALDI-TOF出现dimer
时间Thu Jan 14 22:23:26 2021
最近使用MALDI-TOF打某个protein
出现了dimer 的现象
想问这种状况是因为为什麽呢
会因为不同的细胞培养後纯化的关系
（比如使用HEK293cell 与CHO cell)
还是本身蛋白质纯化後就会有这样的状况
或是跟protein後面接的tag有关系呢？
我是直接买厂商纯化後的蛋白上机，
并不是自己养细胞完纯化。
蛋白质是接Fc
Dimer 情况是未做过reduction & alkylation，
单纯加上matrix 直接上机。
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1F：推 Ianthegood: 因为protein会dimerise?01/15 02:32
2F：→ xxtomnyxx: 印象中 Fc 好像本身就容易 dimerize01/15 05:17
有相关paper可以验证吗？谢谢
※ 编辑: janewu945 (49.216.30.174 台湾), 01/15/2021 09:52:51
3F：推 mgx1024: Fc 有包含 hinge 吗？ 01/15 18:44
4F：→ xxtomnyxx: 有没有paper我不知道，这算是经验吧？之前表现 Fc 和 01/18 12:48
5F：→ xxtomnyxx: Fc fusion protein做western blotting，Fc的lane如果量 01/18 12:48
6F：→ xxtomnyxx: 下多就会在两倍分子量的位置出线讯号，连SDS-PAGE这种 01/18 12:50
7F：→ xxtomnyxx: 环境它都能dimer了，一般没denature它应该更容易dimer 01/18 12:50
8F：推 ganbaba: 买来的Fc通常都有disulfide bond，所以会形成dimer，即使 01/23 09:51
9F：→ ganbaba: 加reducing reagent也有可能少量键结回去形成dimer 01/23 09:51