作者zzzz1234 (zzzz)
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标题[求救] 米酒中微生物RNA抽取多醣污染
时间Tue Dec 22 16:52:53 2020
大家好,我要抽的材料是发酵中米酒里面微生物(大部分是酵母)的RNA,我在取样後先将
样品离心500g 40秒,取上清液将较大颗的米粒去除後再离5000g 5分钟把菌离下来,去除
上清液(还是有一些糊化的米混合在下面的菌里面)之後再开始用trizol来抽取RNA,在最
後用isopropanol沉淀RNA的时候会有出现多醣体的污染。目前已经试过(0.8M柠檬酸钠+1.
2M氯化钠)搭配isopropanol一起沉淀了,虽然有减少沉淀出来的多醣体,但是还是无法完
全去除,严重影响到抽出来的RNA浓度,想请问是否有什麽地方可以改进或是其他方法呢?
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1F:推 Ianthegood: TCEP 植物常用 12/24 17:59
2F:推 Ianthegood: CTAB才对抱歉 12/24 18:00
3F:推 huuban: 有糖的东西TRIzol容易抽不动..建议CTAB或PureLink Plant 12/25 00:34
4F:→ zzzz1234: 不好意思想请问一下CTAB是常用来抽植物RNA用的那我拿来 12/25 12:37
5F:→ zzzz1234: 抽这个样品中的酵母菌RNA会有影响吗? 12/25 12:37
6F:→ zzzz1234: 另外还想询问一下SDS的话是否可以使用? 12/25 12:49
7F:→ robbercat: 你可以参考下面yeast RNA extraction method 此外SDS 12/27 10:23
8F:→ robbercat: 是可以使用的 12/27 10:23
10F:→ robbercat: na-isolation 12/27 10:23
11F:→ zzzz1234: 感谢!!我会试试看protocol 12/28 11:39