作者Shalexx (啃琳)
看板Biotech
标题[求救］如何确定protein和NADPH有结合
时间Fri Sep 25 12:44:35 2020
最近纯化了一个enzyme，他的cofactor是NADPH，substrate候选人也准备好了，
想测这些substrates能不能被这个enzyme作用。
因为这是一个新的enzyme，substrate是预测的，还没有positive control，所
以不知道怎麽确定enzyme是不是有活性。
目前的想法是，希望在和substrate作用前，先透过protein和NADPH的结合来确
定有没有活性。
1.不知道这是不是个可行的方法？
2.如何以简易方式侦测两者有binding？查了有些方法都是以侦测NADP+/NADPH为主，但我
是希望NADPH不要有氧化还原反应。
想请问各位专家们有没有经验，或是解决方法~~谢谢~~
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1F：推 yayayoyi: 看substrate or product吸光值 反应完测一下？ 09/25 17:06
2F：→ yayayoyi: 会不会binding 用LC-MS 09/25 17:06
3F：推 monkey60391: 用isotope label H3? 09/25 17:27
4F：→ Shalexx: 谢谢！~~ 09/26 10:35