作者kaofei (phoebe)
看板Biotech
标题[求救] 抽genomic DNA无法去除RNA contamination
时间Sun Jun 14 23:03:03 2020
想请问我抽DNA phenol-chlorform extraction 又 EtOH precipitation完後
无论是用ddH2O或TE buffer 回溶
加入RNase A (1 mg/ml) 後都会出现一些白色棉絮样无法溶开的沈淀物
屡试不爽
37度两小时做用完後，phenol-chloroform extraction时
这些沈淀物会存在interphase
取水层进行EtOH precipitation，最後回溶在ddH2O
Nanodrop 260/280, 260/230都很漂亮，都在2左右
但将Nanodrop的值跟Qubit assay相比发现有严重的RNA contamination
Nanodrop/Qubit > 10以上
想请问RNase A treatment的消率有多好？
有可能因为RNA量过高导致RNase A digest不完吗？
还是有什麽可能的原因造成RNase被抑制？
因为照着protocol做，其他人都没有RNA污染的问题，但我暂时也想不出哪里有问题
还请大家帮忙解惑
谢谢！
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1F：推 agagy: 其他人没问题，要马拿别人的试剂来做，要马请别人抽你的 06/16 20:23
2F：→ agagy: 样本 06/16 20:23
3F：→ agagy: 不然就药品全部重配 06/16 20:24