作者tychang314 (诚实可靠小郎君)
看板Biotech
标题[求救] 请问如何监定peptide是否coating在96孔盘
时间Wed Apr 29 17:01:10 2020
如题
实验室目前想测量部分抗体於血液中是否有反应
而侦测抗体方式选用ELISA
目前的问题是抗体由於是自制的疏水性蛋白无法确认透过之前的方式
是否能成功coating在96孔盘上
而实验并没有该蛋白 positive control进行测试
请问有办法知道我的盘子是否有办法知道我的盘子是否有coating好
或是相关的经验
目前确认因为coating的抗原量过少(用其他不同确认有反应的的抗原测试)
在HPLC或是直接对盘子进行抗原的成色都与Background差不多
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 1.160.63.104 (台湾)
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1588150872.A.EF0.html
1F：→ gundamhaha: 蛋白有tag吗？ 05/02 01:43
2F：→ tychang314: 没有 05/04 09:47
3F：推 BJ1014: 用ninhydrin test 做个peptide的浓度回归 再用你coat的96 05/04 16:49
4F：→ BJ1014: 孔盘 测coating量 05/04 16:49
5F：→ tychang314: 其实之前有尝试过ninhydrin了 但是好像呈不了色 05/05 01:44
6F：→ tychang314: 其实之前有尝试过ninhydrin了 但是好像呈不了色 05/05 02:03
7F：→ tychang314: bradford也是 05/05 02:03
8F：推 BJ1014: 1.其实ninhydrin要在pH5附近呈色,还有呈色的条件环境其实 05/05 11:22
9F：→ BJ1014: 有点难抓，要靠自己...。2.靠静电coating oligo的分子本 05/05 11:22
10F：→ BJ1014: 来就不好扣，万一都扣不成功，你只好用表面改质法，在plat 05/05 11:22
11F：→ BJ1014: e上coat APTMS，再用戊二醛键结peptide，不过这算是化学 05/05 11:22
12F：→ BJ1014: 材料领域的技术...你也要自己想办法了 05/05 11:22
13F：→ turtle24: 以前的实验室会fusion一个无关的蛋白质 05/05 12:42
14F：推 s505015: bca 05/06 09:35
15F：→ tychang314: 谢谢个位 05/06 18:06
16F：→ ad1980: 我们是做成 GST fusion，但问题是你无法知道 GST 在下面， 06/07 01:49
17F：→ ad1980: peptide 有露出来，有可能是 peptide 被 GST 盖住。 06/07 01:49