作者len851002 (Nick)
看板Biotech
标题[求救] restriction enzyme digestion
时间Thu Apr 9 17:47:02 2020
最近拿到两组vector, 因为是别人给的 所以老师叫我切酵素确认看看.
放37度C一小时
我切完之後电泳的结果在(一)
1号vector看起来是没问题的
但是2号vector的结果我不知道是发生了什麽事 2(cut)很浅..但看起来没有band
後来我又把2号vector切一刀来确认,在图(二) 切完之後也是很多浅浅的DNA,不知道是发生什麽问题...
https://i.imgur.com/phWBu2l.jpg
(一) 1号跟2号都是用同一组水跟buffer
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 101.12.66.83 (台湾)
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1F:推 rebirth: 2号vector的competent cell是否是endA+ strain 04/09 18:42
endo是指endonuclease吗..
2F:→ rebirth: 很像endo没有去除造成plasmid degraded smear pattern 04/09 18:47
3F:→ len851002: 我不太确定是不是endA 因为是别人给的 我可能要明天才 04/09 19:35
4F:→ len851002: 能问一下,那如果是的话要怎麽处理endo呢? 04/09 19:35
※ 编辑: len851002 (101.12.66.83 台湾), 04/09/2020 20:28:39
5F:推 monkey60391: 有的midi kit会叫你多洗几次buffer来去除endo, 通常 04/11 13:23
6F:→ monkey60391: mini/midi的手册上都会写怎麽处理 04/11 13:23