大家好，我已经卡在JC-1很久了
也找非常多protocol 但作法太多种
还请各位帮忙
6well，萤光显微镜（非flow)
是癌细胞 处理药物24小时，去除含药medium，以PBS wash 2次，然後每well加入1c.c
与培养时一样的含FBS血清 medium ，每个well 加入10ug /1ml，培养30分钟，冷PBS清洗
两次，甲醇固定15分钟，DAPI染核15分钟，萤光显微镜拍照
结果，什麽都没有 只有DAPI发光
还有几个问题！
1. 染JC-1时，Medium有没有含FBS重要吗？
要用PBS还是medium？
2. JC-1 加到well 好多漂浮物，摇不开
3.每次避光的细节都有注意，但最後挤个well都会越来越暗
谢谢大家
※ 编辑: dawnga (49.216.40.152 台湾), 04/02/2020 00:58:59
1F：推 shelix: jc-1好像只能看living cell? 看abcam的介绍 04/02 09:49
2F：推 shinink: JC1只能活染 而且JC1很难溶 建议先跟medium混合均匀再加 04/02 10:15
3F：→ shinink: 之前也有做过相同实验 但是DAPI活染效果不好 04/02 10:15
4F：→ Barolo: 你要看什麽东西? JC1不是拿来染粒线体膜电位的? 04/04 02:05
5F：→ Barolo: 还是你只是要染ER？ 很难溶+1 04/04 02:06
6F：推 cjsntu: 有没有含FBS其实不太重要，如果要用萤光显微镜看建议加到w 04/05 00:10
7F：→ cjsntu: ell以前可以用.22过滤，这样颗粒会比较少。 04/05 00:10
8F：→ cjsntu: 会越来越暗的话，有考虑mounting medium加antifade封起来 04/05 00:11
9F：→ cjsntu: 吗？ 04/05 00:11
10F：推 chengeric: 溶解度不好的话,可以考虑用JC-10 04/05 09:06