作者knight791211 (三途河的摆渡人)
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标题[求救] qPCR如何测量最小极限值
时间Wed Jan 8 00:35:21 2020
大家好 如标题
想请问如何用real time PCR 测量最小极限值LOD
我知道传统电泳的方式
就是先定量DNA浓度後连续稀释
电泳看band有无
不过qPCR我就不懂了
难道不是每次用已知浓度做标准曲线再看Ct就好了吗?
这方面查了资料还是不太懂 所以上来请教
感谢各位帮忙
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1F：推 aquaunder: 用分子量计算标准品copy number後 序列稀释qPCR 01/09 00:12
2F：→ aquaunder: 看Ct值退後情况 以及Ct躺平的最低稀释度即可推测LOD 01/09 00:14
3F：→ hitmd: 我用 lod qpcr 下去辜狗蛮多资讯的，可以看看 01/15 16:57
4F：→ nike77114: 序列稀释後得到一检量线，针对该检量线的Standard 02/07 13:30
5F：→ nike77114: error算出数值，而後以斜率除以该se(Y)得到的数字乘上 02/07 13:38
6F：→ nike77114: 3.3得到机器的LOD乘上10得到LOQ 02/07 13:49
7F：→ nike77114: 而後把机器的LOQ作为样品的添加浓度重复7次or以上 02/07 13:50
8F：→ nike77114: 计算标准差(S)，而後带入LOD = t0.99 * S。t0.99 02/07 13:51
9F：→ nike77114: 用excel =T.INV(0.99,df)计算就可以得到真实的LOD 02/07 13:52
10F：→ nike77114: 乘上10就是LOQ了 02/07 13:52