作者ad1980 (吱吱)
看板Biotech
标题Hemagglutination assay (HA)
时间Sat Oct 12 05:53:38 2019
不知道版上有没有人做过 HA,最近遇到一个问题,不知是否有人可以指点迷津。
我之前做的时候是 viral capsid 加猪的 red blood cells,放冰箱一个小时後,会出现
suspension 的现象,没有加 capsid、单纯用 PBS 的 control 其红血球则是会沉下去
。
不过最近做不知道怎麽回事,capsid 都不会出现 suspension 的状况,提高 capsid 浓
度或是换了 PBS 还是一样。
前两天试了新的 batch of capsid 和新的 red blood cells,放在冰箱 40 mins 後拿出
来看,旧的和新的 capsid 都有 suspension,但是拿出来在室温的情况下,二十分钟内
就都又沉下去了(之前放了半个小时都不会这样,再放回冰箱放隔夜还是 suspension)
,但一直找不原因,除了 capsid 外能换的都换了,不知道有没有大大遇过类似的情况,
可以指点一下嘛?QQ
感谢!
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※ 编辑: ad1980 (72.143.239.29 加拿大), 10/12/2019 07:12:09
※ 编辑: ad1980 (173.181.83.100 加拿大), 10/12/2019 09:53:01
1F:推 nprotei: 以前经验是只会在一个时间点观察 例如室温30min後 10/12 11:47
2F:→ nprotei: 之後有可能会变化 例如全部沉降 可能跟测的病毒有关 10/12 11:48
3F:→ nprotei: 要测试 RBC 或是你的蛋白 (或整个步骤 10/12 11:50
4F:→ nprotei: 感觉可以先拿已知浓度的病毒来试 10/12 11:51
5F:→ ad1980: 我之前用 capsid 400x dilution 做都没问题,但是某一天开 10/13 00:36
6F:→ ad1980: 始,同样的 dilution 就全都下沉了,buffer 和 PBS 都是一 10/13 00:36
7F:→ ad1980: 样的,除了那阵子猪血用完换了一瓶新的,但最近又换了一瓶 10/13 00:36
8F:→ ad1980: ,还是一样的情形,完全无法理解为什麽突然就无法 suspens 10/13 00:36
9F:→ ad1980: ion。QQ 10/13 00:36
10F:推 nprotei: 之前出现像你们这麽大的差别 我们是怀疑是动物血的供应商 10/13 09:24
11F:→ nprotei: 因为只是私人的贩售者不是公司 怀疑他随便卖有问题的血 10/13 09:25
12F:→ ad1980: 嗯嗯,我们是跟 Cedarlane 买的,应该不会有不稳定的情况 10/15 22:58
13F:→ ad1980: 。QQ 10/15 22:58