作者pk1512 (Marshall Wang)
看板Biotech
标题[求救] western 的band长短不一
时间Wed Sep 25 17:31:26 2019
实验室用的快速胶，在制胶的过程中是用dropper加的，过程加的也算均匀，不过中间有些?
然後在running跟transfer的过程也算顺利
Transfer时除了一开始buffer不够以外後续就是洗再来加抗体，这次用的是分子量37的GAPD
但是在ECL成色出来的结果band的大小很不均匀
而且中间那条band还特别长特别大还往上跑
原因可能是哪些？拜托求救，失败很多次了
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1F：推 tynse71864: 样品体积都一样吗？ 09/25 19:42
对没错就是那个快速胶，至於样品体积你是说打入well的体积吗？没有欸，每个样品配出来
2F：→ tynse71864: btw 原 po 买的是 TGX 快速胶吗 09/25 19:43
3F：推 bob79620: 看到图回忆起我大学的Data09/25 20:48
※ 编辑: pk1512 (117.19.213.82 台湾), 09/25/2019 23:57:59
4F：推 MLSHBen: 以前实验室是教用等重的protein sample和sample buffer配 09/26 02:10
5F：→ MLSHBen: 好跑电泳的sample後，用1x sample buffer把体积调至一样 09/26 02:10
6F：→ MLSHBen: ，这样才不会体积大的band挤到旁边体积小的band 09/26 02:10
7F：→ MLSHBen: 快速胶没用过就不知道是不是那个的问题了 09/26 02:12
8F：推 darrenyo: 同楼上 样品体积不同的话补1X sample buffer 调到一样 09/26 10:40
9F：→ frwd: sample 调成同浓度同体积,这样在load sample 直接取同量体积 09/26 14:57
10F：→ frwd: 可试 stacking running 时间加长,跑慢,之後调正常running 09/26 15:00
※ 编辑: pk1512 (140.115.48.183 台湾), 09/26/2019 15:12:39
11F：推 tynse71864: 调一下体积至相同就可解决了，我之前是卡在 transfer 09/26 15:15
12F：→ tynse71864: 3分钟 20k以下全部不见了，後来发现是 transfer tank 09/26 15:15
13F：→ tynse71864: 问题; 跑胶部分则没有状况 09/26 15:15