作者catmua0507 (生科小菜鸡)
看板Biotech
标题[求救] Transwell染色後分析
时间Mon Apr 8 00:28:58 2019
各位前辈大家好
先来个前情提要
我对Transwell 完全就是新手
参考youtube abnova migration assay的protocol
後来微调用4%福马林 fix 30min
0.5% crystal violet 染色 30 min
之後用PBS wash刮除上层细胞
在显微镜视野下有裂痕（皱摺）
是因为棉花棒戳的太大力吗？
我目前是把chamber放在玻片上
但是发现很难对焦
（膜上小孔对焦，但染上紫色的细胞无法）
难道只能把膜割下来吗？
（割下来边缘都翘起，用盖玻片也很难压平）
不知道板上有没有推荐的撇步呢？
希望前辈们不吝指教！
站内信留言都可以！感谢大家
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1F：推 fengian: 目前也正在做，可以尝试用10% acetic acid将crystal viol 04/08 18:21
2F：→ fengian: et 去染，然後看是否要用ddH20稀释後去测吸光值。（不知 04/08 18:21
3F：→ fengian: 是否是我细胞数过多，感觉染完的细胞不太好数） 04/08 18:21
4F：推 chinolocal: 裂痕可能是太用力了。不用割下来这麽麻烦，直接放在 04/10 13:59
5F：推 chinolocal: 载玻片上就可以拍照了 04/10 14:01
6F：推 rimo0169: 载玻片上滴一滴PBS，不要有气泡，就比较好聚集 04/13 14:01
7F：推 rimo0169: Chamber保持湿润（但不是一直泡PBS)，细胞才不会缩 04/13 14:04
8F：→ catmua0507: 谢谢大家分享我再试看看！ 04/25 16:04
9F：推 sianpa00: 我是直接把正面chamber放在破片上用显微镜看耶！这样跟 06/25 13:29
10F：→ sianpa00: 割下来不是一样吗？ 记得等风乾之後在去看，染色的细胞 06/25 13:29
11F：→ sianpa00: 才不会被弄下来 06/25 13:29