作者his198995 (心好痛)
看板Biotech
标题[求救] 请问western跑纯化 chimera protein
时间Fri Oct 26 18:54:19 2018
举例实验跑纯化的AB chimera protein，为确认protein位置有放control，分别是
A protein和AB chimera protein，但在lane(AB chimera protein)上有跑出一个
A protein 的band和AB chimera protein的band，想知道为什麽。
大家有跑SDS-PAGE先配好胶放冰箱冰overnight後胶跑得比较漂亮的经验吗?
大家对这有没有任何逻辑想法
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1F：→ z27wi:糟糕 硬的是拳头03/24 23:15
2F：→ wei1120: 湿的是眼眶03/24 23:32
3F：推 xxxx5566: 乾的是输精管03/24 23:52
4F：推 heliosheep64: 软的是楼下小牙签03/24 23:56
5F：→ DareJ: 大家好我是软今天03/24 23:57
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6F：推 july81212: 习惯SDS-PAGE 现配现跑 ；Native冰overnight 先pre-ru 10/26 20:28
7F：→ july81212: n一段再load sample 跑 10/26 20:28
8F：推 july81212: 然後可能就AB control protein 不纯 10/26 20:33
9F：→ july81212: 先前纯化拿时有在跑SEC 确定是单一蛋白吗 10/26 20:33
10F：→ Ianthegood: 两个protein的activity是什麽? 10/26 22:30
11F：→ xxtomnyxx: 前面的问题需要知道你的蛋白质怎麽纯化的，以及你的 10/26 22:48
12F：→ xxtomnyxx: western 是用什麽样的抗体。 10/26 22:48
13F：→ xxtomnyxx: 後面的问题，有一个可能，据说就算 PAGE 已经凝固，其 10/26 22:49
14F：→ xxtomnyxx: 时分子层面上也还没有完全 polymerized，放个 o/n 之後 10/26 22:49
15F：→ xxtomnyxx: 可能因为 PAGE 已经完全 polymerized 所以跑比较好看 10/26 22:50
16F：→ xxtomnyxx: 纯粹猜测 10/26 22:50
17F：→ his198995: IL21R Fc 10/27 00:17
18F：→ ganbaba: 感觉是Fc掉下来了 10/27 09:09
19F：→ xxtomnyxx: 我也觉得可能是 Fc 掉下来了 10/27 18:10
20F：→ Ianthegood: 有必要就过个gel filtration吧 探究原因不一定有帮助 10/27 18:37
21F：推 tynse71864: gel 会丢一个晚上/ 但赶时间就丢一小时 RT 10/27 20:18
22F：推 westernblot5: 冰overnight都蛮好看的 但我是做好了整片胶隔天直 12/29 01:28
23F：→ westernblot5: 接喽蛋白 不知道你的配好了是指胶体还是只是液体 12/29 01:28