作者ararthur (RAYPTT)
看板Biotech
标题[求救] Polyacrylamide DNA gel 跑胶问题
时间Tue Sep 18 11:43:36 2018
各位好，
请问在跑polyacrylamide DNA gel的实验中，
若发生核酸只出现於Lane的左右两侧(特别是1, 1+)，无法形成完整的Band时，
可能会是什麽问题所导致，应该用什麽方法解决？
非常感谢。
Gel图：
https://imgur.com/XR4Em4B
实验设计：
5% Polyacrylamide, 1xTBE, EtBr後染，25-30V, 2-3 hr, 各Lane分别为
M= 100bp DNA ladder;
1 .2 .3 = modified chromatin-IP DNA 进行PCR之产物 (10ul);
1+.2+.3+= modified chromatin-IP DNA 进行PCR之产物 (30ul);
NC= no template negative PCR control.
PS. Sample是以Column purifed的chromosome DNA sample，再进行PCR後跑胶
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1F：推 tynse71864: 跑 DNA 不熟…跑蛋白时倒是发现如果样本体积太小，或 09/18 19:23
2F：→ tynse71864: 没混匀 (比如先加 dye 再 load一点点 Mr) 就会卡两侧 09/18 19:23
3F：→ tynse71864: 解决方法 1.提升样本总体积，补1x bfr。 2. 稍加pipet 09/18 19:27
4F：→ tynse71864: 样本，混匀 (gel well内或 tube 先 mix好都可以) 09/18 19:27
5F：→ blence: 我猜well有盐类析出,跑胶前对每个well都pipet一下 09/18 19:46
6F：→ Ianthegood: overloading吧 看起来你的东西没有需要用到page啊 aga 09/18 20:14
7F：→ Ianthegood: rose不行吗 09/18 20:14