作者fishg1216 (叶绿体)
看板Biotech
标题[求救] 求过表现载体影响农杆菌转殖效率之paper
时间Tue May 22 19:31:35 2018
各位仍辛苦为实验与论文奋斗的同学或前辈，大家好!
之前做番茄转殖，以10天大子叶为培植体，分别转殖两个基因A、B，
A是以35S启动子过表现，B是以自身的启动子去表现。
但我发现A不论是培殖体再生率或转殖率皆远低於B。
因此，我在想是不是基因过表现的关系影响农杆菌活性进而造成此种差异。
为了佐证我的想法
我在Google学术搜寻不论输入agrobacterium、transformation efficiency、
overexpression等关键字仍找不到相关的paper。
所以想寻求有做植物基因转殖的大大们是否有看到这类的文献，
可否张贴文献名称供我查阅，
感激不尽!!!
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1F：→ Ianthegood: 35s没那麽强 确认你的vector没错, protein有in frame, 05/22 23:40
2F：→ Ianthegood: codon usage有看? protein有没有毒性? 抽过RNA看expr 05/22 23:40
3F：→ Ianthegood: ession没有? 都确认过再来看奇怪的假设 05/22 23:40
4F：→ fishg1216: 载体是二元载体pGA482G 05/23 01:00
5F：→ fishg1216: A蛋白是Hsp40,应该无毒性。因为两基因之前都转过菸草， 05/23 01:08
6F：→ fishg1216: 在转殖上没有那麽大差异，转殖株外观与WT也无太大差别 05/23 01:08
7F：→ fishg1216: 没看番茄RNA表现，但学长菸草转殖株RNA都有显着增加 05/23 01:16
8F：→ Ianthegood: 我如果是你我如果要赶毕业不会花时间来看这个东西, 05/23 02:14
9F：→ Ianthegood: 毕竟我只需要一个clone, efficiency再低我也没差. 你 05/23 02:14
10F：→ Ianthegood: 真的要看的话得用同样的基因(可能还得多几个)挂两个 05/23 02:14
11F：→ Ianthegood: 不同的promoter以外可能还得做truncation/rescue实验. 05/23 02:14
12F：→ Ianthegood: 老实讲我觉得比较有可能是你这个cultivar的番茄莫名 05/23 02:15
13F：→ Ianthegood: 对hsp40敏感之类的 05/23 02:15
14F：→ fishg1216: 谢谢l大，或许这也是一个原因。 05/23 22:21
15F：推 hank99911: 通常表现载体不太effect转殖率，比较有可能的是蛋白本 09/26 09:08
16F：→ hank99911: 身的问题，如果两个基因在同一个载体上表现不同通常猜 09/26 09:08
17F：→ hank99911: 的都是蛋白本身的特性 09/26 09:08