作者es77823 (77823)
看板Biotech
标题[求救] 老鼠皮肤组织western
时间Mon Apr 2 21:25:04 2018
想请问版上各位学长姐
把裸鼠皮肤拿去磨之後配好sample去跑western但b-actin却不准
和实验室学长姐讨论过
觉得可能是一开始在剪皮肤时没把黏在皮肤下的膜拿掉
导致脂肪影响actin(因为当初萃取完组织的蛋白时上面浮着一堆杂质，就算离心也无法分离
想请问这样有什麽解决的办法
没做过动物实验还请各位学长姐帮帮忙!
谢谢!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 36.234.10.116
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1F：推 cyc5566: 用ImageJ定量beta actin之後逆定量回去 04/03 00:35
2F：→ blence: 文中也没提到怎麽(有没有)测浓度定量...04/03 01:00
3F：→ es77823: 如果最後真的没有解决办法会用c大的方法的，谢谢！04/03 01:13
4F：→ es77823: 有的！有定量04/03 01:13
5F：推 iyorain: 加dye後多离心几次把上层白色油脂去掉04/03 10:12
好的会试看看！谢谢你
6F：推 tynse71864: 想问 定量时是离完後直接取一点上清；还是会取出全部04/03 13:31
7F：→ tynse71864: 的上清，混合一下再定量？04/03 13:31
我们离完心後取出全部上清 从中取一些来定量及配蛋白
※ 编辑: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:42:33
※ 编辑: es77823 (120.110.127.195), 04/03/2018 13:48:58
8F：推 tynse71864: 可能是不同组的 actin量本来就不同？ 换个 ctrl / 直04/03 21:44
9F：→ tynse71864: 接用 CMB染 membrane看总蛋白量? 04/03 21:44
我们是小鼠皮肤分成四部分，做4种处理，cmb..我会再去问看看实验室学长姐！
※ 编辑: es77823 (1.168.87.251), 04/03/2018 22:03:55
※ 编辑: es77823 (111.82.226.73), 07/26/2018 02:04:16