※ 引述《helen82323 (弦)》之铭言： : 抽活体组织蛋白质，也用BCA测浓度，但是每次跑western的internal control都不是一样粗 : 我是做不同发育时间点的该组织表现量，然而每次都是发育早期的两三个时间点internal control很粗，後期的control很细 : 我用的control是B-actin : 补充一点，因为被这个问题困扰很久，有测过用lysis buffer稀释sample和用ddH2O稀释sample的比较，结果用ddH2O稀释的误差比lysis buffer小很多，两种稀释方法都试过，但actin还是不一样粗 : 我的sample是WT，没有任何处理 : 请问这个问题要怎麽解决？？？ data永远是对的 你确定你的组织在发育早期晚期细胞数量跟大小可以这样比较吗? 总protein expression的量也一样? 如果你的细胞morphology不一样那你的actin很自然的也会不一样 如果你真的很确定你每个时间点的actin是一样的 你有足够的evidence说actin可以拿来当internal control 那你就不要用total protein量做standardisation啊 不想额外跑个eliza就用western的band做standardisation再跑一张 --

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