作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[求救] 请问BrdU切片染色的hydrolysis条件
时间Sat Oct 22 22:36:05 2016
我之前细胞染BrdU一开始没有加HCl,结果抗体都没染到,萤光都留在细胞质(背景),
之後BSA前室温2M HCl 10min,萤光就成功出现在核内和DAPI会重合。
现在我改用石蜡切片,HIER用过citrate pH6或TE pH9,煮沸10min,如果没有
HCl染不上,但是我同样用2M HCl室温10min,结果也没染到。
http://www.abcam.com/protocols/brdu-staining-protocol
我看ABcam protocol,有提到HCl後面接一个Borate Buffer说是
非必要,HCl却又说有些实验人员表示也没必要。确实我看DNA denature的
步骤也有人用高温解决,所以石蜡切片是HIER顺便DNA denature吗?
还是说切片 HCl要用更重或长时间?
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"Don't hate the player. Hate the game."
当看到哪个名人赚了大钱,领到高额补助或利息,不要去指责他,
而是要指责那个制度、创造那个制度的人,以及默许那个制度的人。
不然你认为一个人不领18%或是一个人不炒房价,就会改变整体环境吗?
还不如改变【修改制度的人】,才能从根源改变一切。
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