作者ararthur ()
看板Biotech
标题[求救] Roche Taqman qPCR 请教
时间Wed Oct 28 17:41:18 2015
我想请问Roche Taqman probe实验的问题,
跑出来的图
http://imgur.com/a/irQaZ
三个图分别是不同的3个gene target x 同一组sample+一个no template control
其中一个图有Ct值 但看起来与curve的对照实在不很相同
请问这样的Amplification curve是合理的吗?
特别是有些sample peak最高值不是很高,
若不可信则可能的原因是sample太旧?probe过期?或该如何调整呢?
Sample是小鼠tissue,但放得有点久才抽RNA,
Probe也比较旧,不过Fig3的图看起来最稳,probe却是最老的(2007年买)
No template control 通常是趴得最低的那一条。
谢谢。
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1F:→ Fongshin: 你的图好妙,上面都是抖抖的线 11/03 19:06
2F:→ Fongshin: 以前我做小鼠RNA tissue不会放超过一周才抽,probe 也 11/03 19:13
3F:→ Fongshin: 有放很久的拿来测,是没问题;现在在做大鼠的RNA,别的 11/03 19:13
4F:→ Fongshin: 实验室有给我们RNAlater试剂,可以加在组织里面,就能 11/03 19:13
5F:→ Fongshin: 比较长时间保存,你的图的问题,因为我还很外行,你可以 11/03 19:13
6F:→ Fongshin: 问tagman的业务(ABI?)或是问你使用RNA extraction kit 11/03 19:13
7F:→ Fongshin: 的业务(若为Qiagen 找凯杰公司) 11/03 19:13
8F:→ ararthur: 总算有人回复了 感激(握) 我也不知道他们在抖哪出的 但 11/06 12:29
9F:→ ararthur: 手头上的sample也是Lab其他实验留下来的 另外 我没有拍 11/06 12:29
10F:→ ararthur: 好 最抖的那张图 萤光强度max大概只落在0.2而已 相对弱 11/06 12:31
11F:→ ararthur: 我也问了Roche业务(这是Roche lc480的qPCR) 等不到回应 11/06 12:31
12F:→ ararthur: 阿阿阿 11/06 12:31
13F:→ Fongshin: 打电话催问一下 11/13 00:13