各位板友们大家好 小弟目前要萃取 adherent cells 内的lipid 然後去跑TLC片判别不同lipid 的比例 目前要用的是Fotch 的方法 简述如下: 加入MeOH / CHCl3 (2:1,v/v) vortex 20mins後加入1/5上述体积的0.9% NaCl 之後离心500g,10mins 大部分的paper跟protocol都是针对liquid(like serum)/tissue/suspension cell 但如果是adherent cell 也不可能直接把MeOH /CHCl3 加到culture plate去刮 (plate会溶) PBS刮下来也怕有些phospholipid 会流失 (有想过加MeOH刮,但常温的甲醇也会溶plate) trypsin则不很确定 因为之前拿来extract PI(4,5)P2的kit是说 请不要用trypsin打下来 否则会影响胞内phospholipid的含量 我不知道这个逻辑能否套用在现在的实验上 其他的想法就是 1.加0.9%NaCl/ MeOH刮 收集细胞後再加CHCl3 2.PBS wash後吸乾 直接刮 我们家大部分都做protein实验 lipid extract相关的不多 翻过很多paper/讨论区 对adherent cells着墨很少 希望有经验的板友可以提供一些方法!! 谢谢 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 118.168.119.167 ※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1439299499.A.F51.html