作者charlene822 (是喔)
看板Biotech
标题[求救] 有关细胞实验的Native page
时间Wed May 27 15:17:13 2015
最近教授说要做细胞的native page，原本预设实验步骤是将收好的细胞加入lysis buffe
r後去跑native page，跑完後接着加抗体直接转western，不过结果出来都看不到什麽东
西，想请问几个可能的原因
1.Lysis buffer中的盐类是否要去除，若要去除盐则该怎麽配制?
2. 是否有其他方法可以裂解细胞。
3.跑胶所需要的蛋白浓度是否要改变，目前我是依照实验室跑western的浓度(50ug/ul)跑
的。
4.有什麽我做错的地方或是有跑过细胞native page的高手跪求指导
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 110.26.13.74
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1F：推 huangsw: 我想知道的是你每个lane下的量, 但是你给的是浓度... 05/27 23:02
2F：→ Ice9: 你 lysis buffer 中的内容物和其浓度顺便标一下吧。 05/28 21:32
3F：→ Ice9: huangsw 网友的问题也很重要。另外你的 spacer 宽度多大？ 05/28 21:33
4F：→ melaleuca: 所有东西都要完全乾净没有被任何detergent污染 就跑的 06/27 21:21
5F：→ melaleuca: 出来了 06/27 21:21