作者stone1105 (ㄝ..)
看板Biotech
标题[求救] 用DCF DA染ROS
时间Mon Jan 12 12:54:19 2015
各位先进大家好
我最近在做DCFDA染色的方式来侦测ROS的表现量
大致上的过程
1.种细胞在96well(贴的细胞)
2.两天後满,然後做加药处理或其他
3.时间到後,用PBS wash。然後配置 20uM的DCFDA在2%的PBS里
并每格加100ul。
4.45分钟後,吸掉DCFDA,然後用PBS wash 1次
5.用萤光仪去读盘
可是发现同一次实验3重复的情况下,数值跳动很大
3次不同实验结果也都不太一样..........
用仪光显微镜去看会发现细胞的绿光会越来越强,冏
到底这种实验该如何做会比较稳定呢??
先感谢各位的帮忙
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1F:→ fatstan: flow cytometry?? 01/12 17:00
2F:推 as862437: 要不要先做看染多久会让线达到饱和?应该就不会一直跳动 01/13 01:13
3F:推 p610087924: 可将一个实验组改加NAC做阳性对照组试试看 01/20 08:06