作者pwl ()
看板Biotech
标题[求救] enzyme掺到水了
时间Fri Jan 17 22:56:24 2014
我刚刚要配反应的buffer的时候
第一步加了水
第二步要加2.5倍buffer的时候
不小心加成了eznyme
现在整管enzyme稀释成两倍了
我目前是打算问厂商这个enzyme是溶在怎样的buffer里
再把需要的盐类,抗菌剂之类的加回去
这个enzyme原本就是储存在4度冰箱的,反应温度也是4度
所以我现在是先将不小心稀释的eznyme冰在4度冰箱
然後等厂商回覆
不知道这样的处理有没有问题
还是有其他方法可以解决这种情况呢？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.55.236
1F：→ puec2:109在乎这点小钱喔 你处理完也没人敢用吧 01/17 23:44
2F：→ blence:一般买来DS大多会写storage buffer,厂商会知道吗？ 01/18 02:14
3F：→ pwl:感谢楼上的回覆.随货附上的说明书和管子上没写storage buffer 01/18 14:55
4F：→ pwl:.所以我是请厂商问原厂.这个抗体整间实验室只有我在做,所以 01/18 14:56
5F：→ pwl:不用担心别人敢不敢用.另外我有positive control可以test 01/18 14:57
6F：→ pwl:enzyme的活性.我曾经纯化过一些eznyme,我当时是以acidic 01/18 14:59
7F：→ pwl:glycine elute,然後再换成storage buffer,所以我想短时间内 01/18 15:00
8F：→ pwl:加水稀释成2倍,应该不会影响enzymatic activity,只是不是很 01/18 15:01
9F：→ pwl:肯定,毕竟我的纯化经验也不是很多,所以才会向大家询问 01/18 15:02
10F：→ pwl:我不清楚109和这点小钱这两件事情,和我的问题有什麽关联 01/18 15:05
11F：→ pwl:如果稀释後的enzyme一样有活性的话,为什麽不能用？ 01/18 15:06
12F：→ pwl:上面的“抗体”是笔误,应该是enzyme 01/18 15:07
13F：推 puec2:为什麽可以用? 如果是你 要用奇怪配方稀释过的enzyme吗? 01/18 15:38
14F：→ puec2:还是宁可去买新的? 01/18 15:38
15F：→ puec2:如果你稀释过的enzyme是留着自己用就算了 01/18 15:39
16F：→ puec2:别放回公用区域装没事就好 01/18 15:39
17F：→ puec2:而且这听起来像是ligase之类的东西 拿到你稀释过的enzyme 01/18 15:41
18F：→ puec2:如果做不出来 不就很倒楣? 01/18 15:41
19F：→ puec2:厂商的buffer很多时候是机密 ligase这种东西有时候也是运气 01/18 15:43
20F：→ puec2:运气 01/18 15:44
21F：→ pwl:也许是我的误解,您似乎非常的激动,我还是谢谢您愿意花时间回覆 01/18 15:53
22F：→ pwl:这不是ligase,是一个不是很常使用的enzyme,特殊领域的东西 01/18 15:55
23F：→ pwl:就连我的实验室,也只有我在用,我在推文有提到. 01/18 15:56
24F：→ blence:ligase不会放4度阿,一般enzyme也几乎没听过放4度的 01/18 15:58
25F：→ pwl:我前面的推文的意思是不小心稀释的enzyme,我会先以positive 01/18 15:58
26F：→ pwl:测试过activity,如果没问题,我在应用到我自己的实验 01/18 15:59
27F：→ pwl:当然如果影响activity,我也只能再买新的.我想作实验用的是纳税 01/18 16:01
28F：→ pwl:人的钱,所以想要为我的不小心做补救. 01/18 16:02
29F：→ pwl:另外我不是想用奇怪的配方,是想问问看原厂愿不愿给我原本的配 01/18 16:03
30F：→ pwl:方. 01/18 16:04
31F：→ blence:我想的是如果不是在台的不是大公司,而是小代理商,尤其像你 01/18 16:06
32F：→ blence:的是特殊酵素,小代理大概不会有充裕人力或精神帮你询问这些 01/18 16:07
33F：→ blence:较快的方式还是自己找甚至自己问 01/18 16:08
34F：→ blence:再者,因为你的麻烦是特殊酵素,而不是加水本身,懂得人更少了 01/18 16:11
35F：→ pwl:谢谢blence.我会试着自己问问看原厂,谢谢. 01/18 16:30
36F：→ cillion:用amicon之类的UF换回原先的buffer 01/18 23:52
37F：推 rickson:很欣赏版主的态度 纳税人的钱真的要珍惜 01/19 23:16
38F：→ bloodsuckant:耗材以及时间成本也要一并计算上的阿... 01/20 13:07