请问用4%PFA和5%GTA固定细胞分别需要多少时间? 我查到的文献是用2.5%的glutaraldehyde後用4% OsO2 还要再用tannic acid处里 可以麻烦做过的高人 提供完整的固定过程吗????? Please~~~~~~~~~ 感谢!!!!! ※ 引述《pooldodo (破渡渡)》之铭言： : ※ 引述《qkla (努力阿)》之铭言： : : 我想请问高手,因为sem我没做过也没看过 : : 但学长是使用甲醛来固定高分子薄膜上面的细胞 : : 分别40%,50%....这样固定 : : 所谓固定是怎样呢,是将薄膜浸入甲醛一段时间这样就可以了吗 : : ,还有固定完了的临界乾燥手续,有强者可以说明看看吗 ? : : 感谢大家 : 我不是高手，不过可以给你一点建议 : 一般固定是为了防止细胞在接下来的处理步骤过程中变形 : 所以我们会使用 paraformaldehyde 以及 glutaldehyde 做固定（可能拼错） : 甚至再使用 osmium 固定，防止细胞在脱水的时候变形 : 这边浓度跟固定时间都依照样品的不同而不同 : 我想你可以参考实验室学长使用的浓度 : 但 formaldehyde 绝对不可能是 40 or 50%...... : 我想你这里所谓的 40%, 50%... : 指的应该是接下来脱水的步骤 : 因为样品在上 CPD 前必须经过 ethanol or acetone 的脱水 : 这个时候我们会使用连续不同浓度的 ethanol or acetone 来脱水 : 因为你的 sample 是固定在特殊的薄膜上 : 我不知道你的问题在哪里，也不知道你是固定在什麽样的材料上 : 如果你还需要什麽样的建议或帮忙 : 也许你可以把问题描述的更详细一些 : 这样我们也比较好之道你需要的是什麽样的东西~~ --

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