※ 引述《chaichi (chaichi)》之铭言： : 我是在做小鼠眼睛的石蜡切片染色,用IHC来染色,使用ABC法, : 用脱蜡.vector的ABC之後再用DAB呈色再用hemoxylin染核,但是我染了很多次都没染出讯号 : control(没加一抗)和有加抗体的有颜色深浅差异 : 但从有加抗体那片我无法判断出哪里是有讯号的 : 一片咖啡色,没有一点一点的深咖啡色讯号 : 我在做DAB呈色时,有在显微镜下观察,且成色时间不长,所以应该不会背景太深 : 而我染的组织前面的学长有做过同样天数眼睛的IHC有染出讯号过 : 可以确定此组织可以染出讯号 : 我想问这样我该怎麽办才能染出讯号? : 还有我想问取下组织後泡福玛铃的时间长短会有影响吗? : 因为一直做不出来 实在好困扰 : 希望有人可以告诉我 谢谢 以前也做小鼠眼球染色(萤光和DAB呈色) 我觉得腊切眼球比较容易遇到的问题是 切片常常破片(lens的原因) 但你好像没这方面问题 但是有几个问题 1.你要看到位置是眼球哪个位置?角膜?视网膜?还是..? 2.你染的是什麽蛋白?正常表现状况?表现位置? 3.脱腊的过程也会影响你的呈色?有antigen retrieval吗?是用什麽方式? 你只用了两个字带过。(常常染不上去、背景值高可以改善这步骤) 4.抗体稀释比例也会影响背景值，也没有提供相关资讯 5.你用什麽固定?福马林是formaldehyde 还是 paraformaldehyde? 很努力看才看懂你文章 =_= --

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