作者xxtomnyxx (翼天)
看板Biotech
标题[求救] Dual-Luciferase 的 Internal control
时间Mon Jul 22 21:27:49 2013
请教一下,
由於我所使用的 promoter/enhancer 属於较弱的类型,
之前教我 Luciferase assay 的老师是建议是把我想研究的基因的
promoter/enhancer 接到 pGL3-promoter-vector 上,
利用上面的 SV40 early promoter 增强 ffLuc 的讯号。
现在我遇到一个问题,
如果我怀疑我的实验操作也有可能会影响到那段 SV40 early promoter,
也因此每做一次实验我都还要做 pGL3-promoter-vector 的 control。
我想问的是:
我能不能把 pGL3-promoter-vector 上的 ffLuc 换成 rLuc,
用这个 rLuc 当作 internal control 去消除实验操作对 SV40 early promoter 的影响?
同时 transfect 这两个有许多相同序列的 plasmid 到细胞内,
会不会影响我的实验结果?
PS: 原本用的 internal control 是实验室自己做的用 UbC promoter 表现的 rLuc。
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◆ From: 120.126.39.30
1F:推 aceliang:呃...co-transfect不会有promoter competittion嘛?? 07/22 23:11