作者skyofsilver (silversky)
看板Biotech
标题[求救] 请问流式细胞仪的cell cycle上机步骤
时间Sat Jul 20 10:27:49 2013
各位板大好
想请问各位使用流式细胞仪PI染色看cell cycle的机器操作方面
之前老师是有操作给我看过
简短操作如下(仪器方面): 1. 将FL3(PI)由原先的Log调为Line(线性)
开启FSC SSC 及 FL3的Histogram
2. 开始上Sample 并调整FSC SSC 并Gate所要看的细胞群
3. 调整FL3的Histogram 调整Sub G1, G1, S, G2/M的位置
4. 调整好之後 开始收取Data
我想问的是: 之前有上过课 听说PI染剂非常的黏 有时机器会将黏在一起的两颗细胞
误判为一颗 (ex. 2n+2n=4n) 所以要做一个步骤排除这种误判
我在与老师学实验的时候也有提出这个问题 不过老师却说不用 但并没有
说为什麽
想请问各位板大 我们老师这样的做法是正确的吗? 还是真的少了哪一个步
骤呢? 谢谢!
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◆ From: 218.173.34.99
1F：→ roy047:用FSC就能把黏一团的细胞排除在外了吧... 07/20 10:47
2F：→ skyofsilver:喔喔! 所以这种上法是正确的罗? 07/20 11:08
3F：→ roy047:有control组比较应该就没什问题...毕竟机器操作就那样 07/20 11:21
4F：→ roy047:在意的话就在上之前先轻轻vortex 07/20 11:22
6F：→ qiet:FSC无法分出来的 07/20 11:32
7F：→ roy047:原po可以参考 我是染PI都没碰过这问题啦... 07/20 11:41
8F：推 ZnU:5楼正解，请用FL3-W对FL3-A排除doublets 07/20 12:34
9F：推 ZnU:当然像一楼都没遇过是最好的，这跟cell type也很有关系 07/20 12:36
10F：→ skyofsilver:感谢各位大的解答 所以说明书上p15的方法是要每次上 07/21 11:26
11F：→ skyofsilver:都做吗? 还是觉得Data怪异再做呢? 07/21 11:27
12F：推 potter:我是都做 反正也没差到多少时间 07/21 16:00
13F：→ skyofsilver:好! 谢谢各位大大! 我试试看! 07/21 17:13