作者xxtomnyxx (翼天)
看板Biotech
标题[求救] 用 CD 293 medium 养 HEK293T 细胞
时间Tue Jul 2 00:42:20 2013
我最近要收大量的蛋白质，
这个蛋白质是 secreted protein，
收这个蛋白质主要是要制作 conditioned medium，
以往都是养 HEK293T 在 150 mm dish 中，
然後用 Calcium-phosphate 做 transfection 後再收 medium，
为了让 medium 中不含有任何 FBS 影响接下来的实验，
所以都是用 CD 293 medium 来收 protein 的。
这事以前学长姐的 protocol，
但是後来我发现 CD 293 本身是设计来 suspension culture HEK293 的，
所以我想请问板上的各位，
有没有人有用 CD 293 养 suspension 的 HEK293 的经验？
我想问的问题主要是：
1. 我的实验室的 incubator 都没有 shaker 的功能，
这样还能养 suspension 的 HEK293 吗？
2. 板上有人尝试做过 suspension culture HEK293 cell 来收 protein 的吗？
请问效果如何呢？
3. 养在 flask 中的话 CD 293 medium 大概可以加到几分满？
我是说直立着培养的状况下......还是说不能直立的养？
感谢各位！
不知道 HEK293 本尊会不会出马？
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1F：推 HEK293:.........= = 07/02 08:41
2F：推 ithinksoiam:本尊出现了XDD 07/02 08:44