作者bravelover99 (刘SIR)
看板Biotech
标题[求救] Oil red O 染色玻片乾裂
时间Tue May 14 18:46:42 2013
请问各位有做ORO染色的大家帮忙解答
为什麽我的切片上会有明显的乾燥裂痕
实在不好观察及拍摄
小弟是用ORO来染老鼠liver中的lipid
在老鼠牺牲的当下
新鲜的肝组织随即包埋进OCT(冷冻包埋剂)中冷冻保存
再以-15度C的环境进行冷冻切片
切完结束随即进行染色
以下附上小弟的protocol
fixation in formalin 1 min
wash (简单以top water冲洗玻片背面)
ORO (已以3:2稀释) stain in 10~15 min
wash
hematoxylin (原倍) stain in 5 min
wash
封片观察
网路上有搜寻到很多不同染ORO的方法
小弟均以尝试过
可是仍然无法改善玻片上sample过於乾裂导致的裂痕
请有染色经验的大大帮忙提供解决之道~
感恩>"<
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.94.199
1F：→ vandia:我想问题应该出在"新鲜的肝直接浸OCT"这一步吧...= = 05/16 23:39
2F：→ vandia:中间的步骤也省略太多...随便google任何一个冷切步骤就知道 05/16 23:39
3F：推 homeshawn:请在包埋前用蔗糖溶液脱水。。。。 05/29 03:12
4F：→ homeshawn:此外，不知可有灌流过？ 05/29 03:13