作者allnovels (治玉)
看板Biotech
标题[求救] loading dye挡住我的band
时间Thu Apr 18 01:57:51 2013
我的实验用一组八对primer来做multiplex PCR
其实只是在QC sample quality
但我每次做都觉得loading dye的光影(~200-500bp)遮住我的bands(有两三个在这范围)
(一般来讲不至於看不到,但总是有想要看清楚一点的时候...)
不知道有没有那种没有可见光颜色跑得特别快或慢或是没有可见光的loading dye
可以让我有清楚的8个band...OA
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 192.231.133.253
1F：→ kunhan1013:你可以使用Invitrogen的黄色的dye 04/18 02:04
2F：→ kunhan1013:那一组dye下面那一条(黄色) 会跑得比100bp还快 04/18 02:05
3F：→ milkpa:你可以只加甘油...... 04/18 10:03
4F：推 silverberry:可以试试 orange G，大约 ~50bp 位置 04/18 11:22
6F：→ huuban:所以这是不能退染的罗 / \ 04/18 13:22
7F：→ puec2:其实你应该是跑太久 500bp位置的EtBR往上跑 跟上面还带有 04/18 13:52
8F：→ puec2:EtBR的Gel上的band一比 自然觉得暗淡许多 04/18 13:52
9F：→ puec2:我会建议你先用外染EtBR 15分钟 再退染个10分钟 04/18 13:53
10F：→ puec2:这样照起来你的band就会很漂亮惹 04/18 13:53
11F：→ blence:我猜不是楼上说的那样,他应该是蓝紫两色太浓盖到 04/18 13:55
12F：→ blence:200~500没有理由跑很久,反而multi很可能用附赠的dye会很浓 04/18 13:56
13F：→ puec2:200~500还可以分出来有2~3个 band 总共有8个band 你觉得呢? 04/18 13:57
14F：→ blence:我猜原po内染,而且用commercial dye不是自己配的 04/18 13:59
15F：→ blence:自己配可以调颜色浓淡,不过orange G比较好,真的不会盖到 04/18 14:01
16F：→ blence:我猜原po外染.... 04/18 14:03
17F：→ xxtomnyxx:如果你真的想有 dye 又不想颜色太重，就用水和甘油稀释 04/18 20:30
18F：→ xxtomnyxx:dye 04/18 20:30
20F：推 supray:1%的胶 bromophenol blue大概就你说的那位置 04/19 11:19
21F：→ supray:2%的胶 Bromophenol blue 大概在100bp的位置 04/19 11:20
22F：→ allnovels:我确实是被蓝色盖住的...我们的imager蓝色那区就是光圈. 04/19 12:47
23F：→ allnovels:不过加甘油稀释应该是一定可以做的 04/19 12:48