作者cdkcyclin (ilovesuju)
看板Biotech
标题[求救] 请问plasmid cotransfection的问题?
时间Mon Apr 15 00:31:30 2013
想请问各位是否遇过类似的问题，
我将两个等量的plasmid同时利用lipofectime2000 transfect到HEK293细胞中
但是每次都是某个plasmid的表现量很低
有时候甚至没有表现
一开始我怀疑是不是plasmid有问题
所以重新做了maxi prep 也送了定序
都是ok的
想请各位有遇过类似的问题吗?
或者可以给我一点建议呢?
谢谢!!
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◆ From: 95.117.122.145
※ 编辑: cdkcyclin 来自: 95.117.122.145 (04/15 00:32)
1F：→ blence:single transfec应该是正常的吧,为什麽会怀疑sequence有错? 04/15 02:39
2F：→ blence:如果是因为single transfec表现量就不正常,那标题明显误导 04/15 02:41
3F：→ blence:一般来说cotransfec有干扰很常见,连plasmid跟si一起放也会 04/15 02:46
4F：推 joseph103331:正常 干扰也有可能是表现的竞争 04/15 17:26
5F：→ joseph103331:看你的实验目的是什麽 有时候量不同没关系 有时候有 04/15 17:26
6F：→ puec2:会耶 我送两个plasmid也常常遇到一个很强另一个很弱的 04/15 20:17
7F：→ puec2:如果两个plasmid用不同promoter会好一点吗? 04/15 20:17
8F：→ a90648:会，用同一个就变成竞争啦 04/16 09:45
9F：→ puec2:但是这样一口气要改24个plasmid...想到就懒 04/16 12:27
10F：→ puec2:最神奇的是我的control不管怎麽表现 两个plasmid的表现量 04/16 12:27
11F：→ puec2:一直都很稳定 只有实验组会有表现不平均的情形 04/16 12:27
12F：推 chaunen:药会影响protein stability? 04/16 19:14