作者BGG (干 不要查我 )
看板Biotech
标题Re: [求救] 跑SDS-PAGE蛋白浓度?
时间Wed Apr 10 16:48:11 2013
※ 引述《muffinex (bji4h6)》之铭言:
: 标题: [求救] 跑胶只有marker出现
: 时间: Tue Apr 9 23:42:36 2013
:
: 抱歉,重新发问
: 我用的是biorad的western
: 想知道作sds-page有最低限度蛋白质浓度才跑得出来吗?
: 因为我的elut用BSA测出来只有3ug/ml
: 胶是用12%的!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
: ◆ From: 140.118.160.191
: → blence:你紧张到没说你如何评断怎样是有跑出来以及何谓没跑出来 04/10 00:14
: 推 leptoneta:跳海? 04/10 01:31
: → joseph103331:侦测方法是? Western? 04/10 02:48
: 推 mesenchymal:提供资讯太少,把方法目的都列出来吧! 04/10 07:15
: ※ 编辑: muffinex 来自: 140.118.160.191 (04/10 12:32)
: → blence:说到elute应该是纯化的产物,重新发问给的资讯还是一样很少 04/10 14:27
不懂你的问题
你是说,你跑 SDS-PAGE 只看到 Marker 没看到你纯化的protein?
还是 western 压片只看到 positive control?
如果是 SDS-PAGE 没看到 Protein signal,还要看你是用那一种染色方式
一般coomassie blue染色,total protein 大概 100ng 就是极限...
如果是 western 压片後没看到 signal,那要注意的事情很多
所以你的问题是那一个??????
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◆ From: 211.75.103.76
1F:→ muffinex:後来跟学长讨论,应该就是我蛋白量太少..谢谢!!! 04/10 21:10