作者amebakid (华氏温度N N N)
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标题[求救] Raw 264.7 培养时出现plaque
时间Tue Apr 2 03:48:42 2013
我现在正在养RAW 264.7,可是一直出状况,真的不知道要怎麽办了.
我的RAW 264.7是从之前实验室stock解冻的,代数大概是20左右,
前面几个passage都很正常,细胞数跟形态都没有问题,
可是大概到了解冻後第7-8代时(细胞代数27左右),
第一次在flask中发现一两个像是plaque的形成.
就是flask其他地方都是满的,不过中间就有两个圆圆的小洞没有细胞生长
问过教授教授要我先继续subculture,
可是subculture发现plaque变多了.
整个状况就跟传染病一样.
後来我们直接从ATCC再订一次细胞,
这次更惨,recover後一代就出现类似plaque的状况.
这次我用了全新配的medium.
medium:DMEM +10%FBS +1%pen/strep +1%HEPES
Flask: T75 and T150
passage:用scraper将细胞刮下.
plaque形成时的状况:medium很清澈,ph值也在正常范围内.
显微镜下的细胞大部分都是圆圆亮亮的.
也没有看到除了细胞以外的东西.
我想问一下有没有人有遇到过类似的问题?
或是有人知道是甚麽原因造成的,我真的抓到头快破了T_T
感激不尽!!
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