作者hsin37 (因祸得福???)
看板Biotech
标题[求救] Trizol抽RNA~
时间Mon Apr 1 18:04:23 2013
想请问各位前辈
使用Trizol抽"植物"RNA时
在Agaross gel 上 28s:18s rRNA的比例有办法到1.8~2.0吗?
最近在做real-time PCR,但是biological repeat间的error bar很大
再想是否与RNA的品质有关
文献上说rRNA的比例要到1.8~2.0
可是我们实验室抽出来都只有1 >"<
......我们老师说磨的时候用力一点.....就会抽得比较好.....
可是我很怀疑啊~~~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 133.50.190.84
1F：→ iceking:RNA超容易degrade 也许有关~ 04/01 18:27
2F：→ huuban:是指QC的ratio吗？那个有时候跟物种有关 04/01 18:30
3F：→ huuban:磨得细应该是回收量比较大吧..个人认为只要有磨还是可以抽 04/01 18:31
4F：→ emilylienya:磨到很细有用喔!以前Lab也碰过类似的问题 04/01 21:32
5F：→ chougham:我会再用DNASE I处理~然後用PHENOL-CHLOROFORM萃一遍 04/01 21:55
6F：→ hsin37:有做DNase处理跟再萃取，以吸光值来看是没有问题>"<但是就 04/02 11:21
7F：→ hsin37:好像被分解掉了~那磨sample是on ice吗?ambion的protocol是 04/02 11:24
8F：→ hsin37:常温磨，我有点不太理解...这步会有很严重的影响吗? 04/02 11:25
9F：→ huuban:我习惯加液氮磨耶 04/02 13:23
10F：→ huuban:你有gel图可以让大家看看吗？ 04/02 13:24
11F：推 kunhan1013:液态氮磨 +1 04/11 14:26
12F：推 oscarcc:你之後有用phenol/chloroform 吗? 05/01 02:12
13F：→ oscarcc:记得离心後不要吸到下层的有机层，祝顺利 05/01 02:13