作者vetvet ( )
看板Biotech
标题Re: [求救] Baculovirus蛋白表现
时间Tue Mar 12 22:26:53 2013
假设clone有作成功......
让我想到需要调整的是
表现条件(病毒感染量，表现时间点......)的优化？
※ 引述《josephkokomo (...)》之铭言：
: ※ 引述《mysterywind (mysterywind)》之铭言：
: : 发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
: : 以方便板友帮您追踪问题
: : ----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
: : 请问有人做过Baculovirus的蛋白表现吗?
: : 我一直无法表现我的目标蛋白
: : 确定有转染成功 也有抽病毒DNA
: : 但是 跑SDS WB就是没东西?
: 你是指用Baculovirus system表达你要的蛋白吗
: 另外假设是cytosolic protein
: 1. Cre那步骤之後 你有确定你的DNA被insert成功吗
: 2. virus 有测过 titer吗 或是你确定加入virus有成功感染你的cell (可以从生长曲线推测)
: 3. virus infection 之後 等多久作SDS-PAGE
: Invitrogen(life)的使用手册有完善的教学
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