作者josephkokomo (...)
看板Biotech
标题Re: [求救] Baculovirus蛋白表现
时间Tue Mar 12 13:55:43 2013
※ 引述《mysterywind (mysterywind)》之铭言：
: 发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
: 以方便板友帮您追踪问题
: ----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
: 请问有人做过Baculovirus的蛋白表现吗?
: 我一直无法表现我的目标蛋白
: 确定有转染成功 也有抽病毒DNA
: 但是 跑SDS WB就是没东西?
你是指用Baculovirus system表达你要的蛋白吗
另外假设是cytosolic protein
1. Cre那步骤之後 你有确定你的DNA被insert成功吗
2. virus 有测过 titer吗 或是你确定加入virus有成功感染你的cell (可以从生长曲线推测)
3. virus infection 之後 等多久作SDS-PAGE
Invitrogen(life)的使用手册有完善的教学
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