作者spirithorse (咩)
看板Biotech
标题[方法] Migration assay不均匀
时间Tue Jan 1 18:39:40 2013
最近做Migration时好时坏
做三重覆会有其中一个几乎空白,另外两个正常
(或是更惨..三个都空白)
本来以为会不会是Fibronectin有问题(配错??)
但是做了9个well,有4-5个是全空白
或是well中间一圈完全没细胞 如图:
http://ppt.cc/BCIb
请问是否有人遇到过类似的问题
或帮我想想大概有哪里需要注意的眉角
谢谢!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.35.0.61
※ 编辑: spirithorse 来自: 114.35.0.61 (01/01 18:41)
1F：→ gryou:有气泡？ 01/02 17:30
2F：推 ling0714:我是中间一大坨细胞= = 01/02 17:42
3F：→ isntangel:这是用transwell做的吗?我是不知道fibronectin要干嘛 01/02 18:22
4F：→ isntangel:我做的还蛮漂亮的@@~还是做不出~改wound healing看看罗 01/02 18:24
5F：→ isntangel:简单又省钱^^ 01/02 18:24
6F：→ spirithorse:加入Fibronectin後有敲打plate,确定没有气泡 01/02 21:03
7F：→ spirithorse:to instangel..一定要做出来啊!!! 01/02 21:04
8F：→ isntangel:是用来coating嘛？migration不用抠吧? 01/03 02:30
9F：→ hhhhh100000:也有卖coating好fibronectin的transwell 01/03 13:01
10F：推 abcam:可以换换别家的transwell呀... 01/03 21:07
11F：→ abcam:保吉生化学、Coring、BD 都有卖的样子..我都用过..都不错! 01/03 21:08
12F：→ keeny:这种情况我遇过,跟细胞大小和爬的速度有关,可以试着放久点 01/08 14:22
13F：→ keeny:不过我建议不要用这种方法实在太主观,可以用corningHTS 96W 01/08 14:24
14F：→ keeny:最後再去用Calcein AM染,然後读萤光,客观又不会被攻击. 01/08 14:26
15F：→ keeny:我之前被reviewers电的很惨. 01/08 14:28
16F：→ isketo:insert内的体积加到200 ul,可以减少load 後细胞往insert周 01/15 15:00
17F：→ isketo:边聚集的现象。 01/15 15:02