作者d200190 (瞌睡熊)
看板Biotech
标题[求救] THP-1 Cell培养
时间Sat Dec 29 02:05:09 2012
最近开始养THP-1这株细胞，学长姐的说法是这株细胞很脆弱，非常容易活化，
於是我参照ATCC建议的浓度作passage，不让细胞浓度超过1*10^6/mL，每次passage
都稀释到2*10^5/mL左右种下去，但是这样他的成长非常缓慢，甚至没有变多，贴附
到Dish上的细胞也很少表示他没有活化，但就是不长，请教过学长姐之後，得到
的说法是起码要种2*10^6/mL才会长比较好，请问各位有这样的经验吗?因为学长姐
养起来真的看起来都要满出来了。
另外，将Medium换成Serum free的RPMI之後，细胞会马上贴在Dish上，但是10个小
时後似乎又正常的浮起来了，我google了一下这个现象，是看到有人有一样的问题，
但是没有一个好的解决方法，请问这是正常的吗?贴了又浮起来的细胞是正常的还是
活化完又死掉的呢?学长以前没有换完Serum free之後马上观察的经验所以也无法解
答我的问题，只说细胞似乎还是活着的。
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◆ From: 118.169.228.212
1F：→ roy047:不长会不会是细胞继代太多次而老化呢? 自身经验是长很快 12/29 19:46
2F：推 jethuang:THP-1应该长很快,而且容易形成团块,会不会cell 还在适应 12/29 22:58
3F：→ jethuang:medium啊??mediumu 有加足够的L-glutamine 与 glucose吗? 12/29 23:07
4F：→ chvkimo:细胞又飘起来 怀疑是否是死 染 trypan blue 看看 12/30 00:18
5F：→ d200190:细胞换Serum free以後居然疯狂的长...我该去检查FBS了... 12/30 01:22
6F：→ duriamon:依我的经验,由於这株细胞养的过程会自己释放生长因子所以 12/30 19:16
7F：→ duriamon:开始培养的时候细胞浓度尽量越浓越好,每2~3天帮补培养基 12/30 19:17
8F：→ duriamon:当你看到细胞长的一团一团你就成功了,之後培养时都采用补 12/30 19:26
9F：→ duriamon:培养基的方式,每1-2星期将细胞离心继代,但要再补一些旧的 12/30 19:27
10F：→ duriamon:培养基(因为含生长因子) 12/30 19:28