作者shion1221 (shion)
看板Biotech
标题Re: [求救] HIF-1a 的western 条件
时间Wed Dec 19 18:33:50 2012
不好意思，借标题想请问一下
各位前辈用的缺氧装置是市售的缺氧chamber，
还是是自己利用几块压克力板自行制作呢？
还是是用CoCl2 induce呢？
感谢各位~
※ 引述《aggaci (可找我下棋..)》之铭言：
: ※ 引述《Basketball (future)》之铭言：
: : 最近在跑HIF-1a
: : 不知道是不是transfer的问题还怎样
: : 一下压得出来同样sample同样condition又压不出来
: : 不知道版上是否也有人在跑HIF-1a的能否给我些意见
: : 我使用是8%下胶 3%上胶
: : transfer是使用湿式 400mA 70分钟 (实验室学姐之前用此条件跑iNOS 130KDa都有跑出来)
: : gel用comassin blue染後确定有transfer过去
: : memb.用丽春红染有淡淡的protein(所以不知道是不是transfer条件不好?)
: : 压出来有时候有 有时候没有
: : ECL 也用过advance的 也压不出来
: : sample 每well load 50ug(是细胞的 所以应该算load够多了)
: : 总之 请有在跑HIF-1a的给我些建议
: : 谢啦.
: 对不起
: 借问一下
: 我问到HIF1a的抗体大部分都只认人类的HIF1a
: 老鼠的部分 datasheet都说不确定
: 刚好我的细胞是老鼠的细胞(MEF)
: 所以不晓得是否有板友能推荐比较好的抗体??
: BD的有人说不错 但可以认老鼠的HIF1a吗?
: 谢谢
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◆ From: 140.130.98.82
1F：推 aceliang:看你要做什麽实验罗 12/19 23:20
2F：→ shion1221:要做间叶干细胞缺氧部分的实验 12/20 19:00
3F：→ untilnow:可以先用cocl2做啊 12/20 21:44